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微生物實(shí)驗(yàn)室里面的干粉培養(yǎng)基應(yīng)該如何管理?

更新時(shí)間:2020-11-24      點(diǎn)擊次數(shù):2025

    在微生物檢驗(yàn)中,干粉培養(yǎng)基的質(zhì)量關(guān)乎微生物的檢驗(yàn)結(jié)果。加強(qiáng)對(duì)培養(yǎng)基的質(zhì)量管理,能夠有效提升微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)性,因此需要注重培養(yǎng)基的質(zhì)量管理工作。本文從培養(yǎng)基的采購(gòu)驗(yàn)收、質(zhì)量控制、培養(yǎng)基制備后的質(zhì)量控制以及培養(yǎng)基的滅菌和儲(chǔ)存等環(huán)節(jié)簡(jiǎn)要分析了培養(yǎng)基的質(zhì)量控制工作。

    01、干粉培養(yǎng)基供應(yīng)商選擇

    培養(yǎng)基應(yīng)當(dāng)從可靠的供應(yīng)商處采購(gòu),必要時(shí)應(yīng)當(dāng)對(duì)供應(yīng)商進(jìn)行評(píng)估。評(píng)估應(yīng)確定其生產(chǎn)工藝,運(yùn)輸條件是否符合規(guī)定,資質(zhì)是否齊全,質(zhì)量保證能力和生產(chǎn)能力是否符合需求。如果新增培養(yǎng)基供應(yīng)商,應(yīng)對(duì)該廠家所生產(chǎn)的不同批次的培養(yǎng)基理化及微生物指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè),并進(jìn)行審計(jì)評(píng)估,評(píng)估合格后才可以將該品牌納入合格供應(yīng)商名錄。

    02、干粉培養(yǎng)基初步驗(yàn)收

    在培養(yǎng)基到達(dá)實(shí)驗(yàn)室后,應(yīng)安排專業(yè)的人員對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行驗(yàn)收,首先查看培養(yǎng)基的名稱是否正確、配方是否符合藥典或國(guó)標(biāo)等相應(yīng)的法規(guī)文件的要求、是否臨近有效期、生產(chǎn)批號(hào)是否清晰、能否提供商品質(zhì)檢報(bào)告、檢查包裝是否完整,規(guī)格、數(shù)量是否與采購(gòu)申請(qǐng)一致。在接收完畢后安排管理人員進(jìn)行入庫(kù)保存,并盡快安排對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行入廠檢測(cè)。

    03、培養(yǎng)基理化及微生物檢測(cè)

    培養(yǎng)基的理化指標(biāo)主要包括pH值、澄明度以及凝膠強(qiáng)度(瓊脂類),培養(yǎng)基的微生物指標(biāo)一般包括:靈敏度、促生長(zhǎng)能力、抑制能力以及指示特性,即培養(yǎng)基適用性檢查。這些指標(biāo)供應(yīng)商在培養(yǎng)基出廠前就已經(jīng)進(jìn)行了檢測(cè),合格后放行。使用單位驗(yàn)收時(shí)仍需進(jìn)行培養(yǎng)基適用性檢查,并與廠家提供的質(zhì)檢報(bào)告進(jìn)行對(duì)比,看與報(bào)告內(nèi)容是否一致。使用單位也可采用有資質(zhì)的第三方檢測(cè)報(bào)告。

    04、干粉培養(yǎng)基儲(chǔ)存

    對(duì)入庫(kù)保存的培養(yǎng)基應(yīng)張貼標(biāo)簽,以區(qū)分驗(yàn)收與未驗(yàn)收的培養(yǎng)基,避免混淆與差錯(cuò)。在此為大家提供一個(gè)簡(jiǎn)單的標(biāo)簽,僅供參考:

    使用單位存儲(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)標(biāo)簽也可以做編號(hào)處理,例如購(gòu)進(jìn)100瓶TSB,產(chǎn)品號(hào)為11104,其編號(hào)為11104-100-1、11104-100-2、...、11104-100-100按照流水號(hào)領(lǐng)用培養(yǎng)基,可減少對(duì)培養(yǎng)基的盤點(diǎn),方便管理。

    培養(yǎng)基的儲(chǔ)存條件一般為常溫、干燥、密閉,當(dāng)然不同供應(yīng)商的存儲(chǔ)條件稍有差別,按照標(biāo)識(shí)執(zhí)行即可。稱量后應(yīng)及時(shí)旋緊瓶蓋,避免后期存儲(chǔ)因空氣濕度較大受潮或結(jié)塊,如出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象,該瓶培養(yǎng)基不可繼續(xù)使用。

    培養(yǎng)基開瓶后在稱量和存儲(chǔ)的過(guò)程中會(huì)不可避免的吸收空氣中的水分,而水分含量的增加,培養(yǎng)基的微生物負(fù)載可能亦隨之增大,進(jìn)而影響到干粉培養(yǎng)基的質(zhì)量。所以干粉培養(yǎng)基在開瓶后,應(yīng)定期進(jìn)行復(fù)檢,并對(duì)復(fù)檢結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,確定開瓶有效期。

    如果實(shí)驗(yàn)室所在地區(qū)濕度較大(相對(duì)濕度高于75%),開瓶后的培養(yǎng)基應(yīng)采取適宜的保護(hù)措施,如果數(shù)量較少,可放置于干燥器內(nèi),如果數(shù)量較多,可使用封口膜瓶口位置纏繞數(shù)匝。

    05、培養(yǎng)基配制--稱量

    培養(yǎng)基的制備環(huán)節(jié),應(yīng)當(dāng)嚴(yán)格按照培養(yǎng)基配方制備,在培養(yǎng)基的稱量過(guò)程中,建議在干爽、無(wú)風(fēng)的區(qū)域或者通風(fēng)柜中進(jìn)行,這樣能夠避免培養(yǎng)基吸潮使稱量結(jié)果不準(zhǔn)。應(yīng)當(dāng)選擇靈敏度較高的稱重天平,這樣能夠保證稱量的準(zhǔn)確性,同時(shí)稱量過(guò)程中要選擇的稱量匙,避免其他雜質(zhì)混入培養(yǎng)基中。操作人員應(yīng)當(dāng)對(duì)稱量過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)的記錄,記錄中應(yīng)該體現(xiàn)培養(yǎng)基名稱、批號(hào)、稱量數(shù)量、具體配制方法、制備人姓名日期、復(fù)核人姓名日期等信息,方便后期的溯源調(diào)查。

    06、培養(yǎng)基配制--容器和水

    配制培養(yǎng)基所用的容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量,一般為玻璃容器,培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈,可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來(lái)物質(zhì)殘留。在大體積配制培養(yǎng)基時(shí),企業(yè)也可根據(jù)自己的情況采用不銹鋼容器,建議專鍋,且容器應(yīng)潔凈。不建議使用陶瓷或搪瓷容器。

    培養(yǎng)基用水是培養(yǎng)基制備過(guò)程中非常重要的一個(gè)物質(zhì)。不可以使用自來(lái)水,自來(lái)水中的雜質(zhì)可能會(huì)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有一定的影響。許多法規(guī)在培養(yǎng)基配方中采用蒸餾水作為配制用水,實(shí)際上純化水的潔凈程度不差于蒸餾水,甚至更優(yōu),所以不必單獨(dú)制備蒸餾水,直接使用純化水即可,配制用純化水應(yīng)按藥典的要求定期進(jìn)行檢測(cè)。

    在制備過(guò)程中,可先加入培養(yǎng)基,再將純化水倒入容器內(nèi),同時(shí)需要將器具內(nèi)壁上的培養(yǎng)基粉末一同帶到容器中,然后根據(jù)說(shuō)明書的要求進(jìn)行操作。涉及到大體積配制后要分裝的培養(yǎng)基(例如TSA、TSB、FTM等),分裝前一定要將培養(yǎng)基加熱至*溶解,避免后續(xù)可能會(huì)出現(xiàn)的瓶間差異。

    07、培養(yǎng)基的滅菌

    培養(yǎng)基的滅菌過(guò)程是影響培養(yǎng)基質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。大部分培養(yǎng)基需要高溫高壓濕熱滅菌,但部分選擇性培養(yǎng)基由于一些組分不可高溫高壓滅菌,所以會(huì)采用煮沸滅菌,因此滅菌前應(yīng)閱讀培養(yǎng)基使用說(shuō)明。

    培養(yǎng)基滅菌應(yīng)采用驗(yàn)證過(guò)的滅菌程序,滅菌參數(shù)應(yīng)通過(guò)無(wú)菌性試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)的驗(yàn)證。此外,對(duì)高溫高壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證,以保證其在一定裝載方式下的正常熱分布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基過(guò)度加熱,過(guò)度滅菌會(huì)影響絕大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)質(zhì)量。滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也會(huì)影響加熱的速度。因此應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性,進(jìn)行全面的滅菌程序驗(yàn)證。

    煮沸滅菌的培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用,高溫高壓濕熱滅菌的培養(yǎng)基可以大量配制,在適宜的條件下儲(chǔ)存,固體培養(yǎng)基滅菌后只允許一次再融化。滅菌后培養(yǎng)基的儲(chǔ)存效期應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證。

    制備好的培養(yǎng)基,使用前需進(jìn)行pH的監(jiān)測(cè)。對(duì)于固體培養(yǎng)基pH監(jiān)測(cè),可使用平頭電極或固液兩用電極。
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